2026年6月16日国家疾病预防控制局发布WS/T10051-2026《消毒剂持续消毒效果实验室评价方法》，标准将于2026年12月1日正式落地实施。该标准填补国内硬质表面长效消毒能力标准化检测空白，统一24h持续消毒效果全套试验操作、数据判定与全流程质控规则，成为消毒企业产品备案、第三方实验室检测、院感产品性能验证的核心依据。

　　以往市场上“长效抑菌”“持续防护”类消毒剂缺少统一验证手段，检测流程、判定尺度参差不齐，极易出现宣传虚标、检测数据不具备采信效力等问题。新标准通过模拟真实场景反复摩擦、多次污染的工况，量化评估消毒剂静置24h后的残留杀菌能力，明确完整试验操作规范与严苛质控红线，全面规范长效消毒产品检测全链条。

　　一、标准基础界定：适用范围与核心专业术语

　　1.适用边界

　　本标准仅用于硬质无孔物体表面消毒剂持续消毒效果实验室评价，覆盖不锈钢、玻璃、硬质塑料等致密无渗透材质；不适用于木材、纺织物等多孔载体消毒产品检测。标准核心评价对象为≥24h长效消毒作用，验证消毒剂长期附着表面后，经反复污染、擦拭干扰仍具备稳定杀菌性能。

　　2.五大核心术语统一定义

　　初始接种：灭菌载体滴加菌悬液与有机干扰物，作为试验初始染菌步骤；

　　再接种：擦拭循环阶段重复添加菌液，模拟环境持续反复污染场景；

　　最终接种：整套擦拭循环全部完成后，最后一次向载体添加菌液，用于终点活菌计数；

　　持续消毒作用：消毒剂在物体表面维持24小时及以上微生物杀灭能力，即行业常说的长效消毒；

　　硬质无孔物体表面：结构致密、液体气体无法渗透吸附，仅能附着污渍与消毒剂的接触面。

　　3.配套引用基础标准

　　整套试验操作需同步遵循4项现行消毒检测规范，所有菌液制备、载体处理、活菌计数流程均需配套执行：GB/T38498-2020消毒剂金属腐蚀性评价方法、GB/T38502-2020消毒剂实验室杀菌效果检验方法、WS/T683-2020消毒试验用微生物要求、WS/T10009-2023消毒产品检测方法。

　　二、标准化试验全流程拆解（核心操作要点）

　　（一）试验器材标准化配置（质控源头）

　　标准试验菌株：基础必测菌株为金黄色葡萄球菌（ATCC6538）、大肠杆菌（8099）；针对特定使用场景的消毒剂，可按需增选目标致病菌；

　　统一染菌载体：直径24.0mm±0.1mm、厚度1.0mm光滑不锈钢圆片，按金属腐蚀标准预处理、高压灭菌，单次试验即用即弃，禁止重复清洁复用；

　　配套试剂清单：胰蛋白胨生理盐水TPS、0.03mol/LPBS缓冲液、0.6%牛血清白蛋白有机干扰物、TSA胰蛋白胨大豆琼脂、合格中和剂、硬度342mg/L标准硬水；

　　标准化擦拭装置：总重210.0g±2.0g砝码离心管，搭配四层折叠100%聚丙烯无纺布擦拭布，擦拭布单次干/湿擦拭后必须更换，规避交叉污染。

　　（二）试验前期预处理步骤

　　分级菌悬液配制

　　菌株选用第3~8代18~24h新鲜培养物，分三类菌液配比：初始/最终接种菌液浓度1×10⁸~5×10⁸CFU/mL，再接种菌液1×10⁶~5×10⁶CFU/mL；所有菌液与0.6%BSA按1:1混合，模拟人体分泌物、油污等有机污染环境。

　　载体分组与染菌

　　试验组、阳性对照组各设置2片平行载体，滴加10μL初始菌液均匀涂布，36℃±1℃烘干备用；试验载体滴加0.1mL说明书标注使用浓度消毒剂，对照组滴加等量标准硬水，室温静置24h自然晾干，模拟长效静置周期。

　　环境条件管控

　　全部擦拭循环需在20℃±2℃、相对湿度40%~70%环境开展；若消毒剂产品说明书有特殊使用温湿度要求，可按产品标注调整试验环境。

　　（三）模拟实景擦拭循环操作（核心干扰环节）

　　单次完整擦拭循环包含四道工序：干擦拭→干擦后再接种→湿擦拭→湿擦后再接种。整套试验执行两轮完整循环，第三轮仅完成湿擦拭，干燥后直接进入最终接种流程，完整模拟日常清洁、反复污染的真实使用场景：

　　干擦拭：擦拭装置垂直贴合载体，仅施加水平推拉作用力，单次往返完整擦拭整片不锈钢表面；

　　干擦后再接种：滴加10μL低浓度再接种菌液，涂布烘干，模拟第一次二次污染；

　　湿擦拭：擦拭布距离75cm喷水两次，重复水平往返擦拭操作；

　　湿擦后再接种：表面完全干燥后二次染菌，完成单次循环；

　　每一轮干、湿擦拭均更换全新无菌擦拭布，杜绝残留菌液干扰数据。

　　（四）终点接种、洗脱与培养计数

　　全部擦拭循环完成后执行最终接种，菌液作用10min开展活菌洗脱：

　　试验组载体投入含合格中和剂的离心管，中和残留消毒剂活性；

　　阳性对照组使用含0.1%吐温PBS溶液洗脱；

　　同步设置阴性对照：标准硬水、中和剂、稀释液分别平板培养，验证试剂无菌状态；

　　洗脱液梯度稀释后涂布平板，36℃±1℃恒温培养48h，统计各组菌落数用于杀灭对数值计算。

　　三、结果评价判定规则（合规硬性指标）

　　1.长效消毒合格判定标准

　　试验需独立重复三次，三次试验杀灭对数值KL全部≥3.00，方可判定该消毒剂具备24h持续消毒效果。

　　杀灭对数值计算公式：KL=N₀-Nₓ

　　式中：N₀为阳性对照组活菌数对数值，Nₓ为试验组活菌数对数值。杀灭对数值≥3.00代表产品杀菌率达到99.9%，满足长效消毒基础门槛。

　　2.试验有效前置条件（任一不满足试验作废）

　　阴性对照组所有培养平板无菌落生长，证明试剂、耗材无杂菌污染；

　　阳性对照组单片载体回收菌落数稳定在1×10⁶~5×10⁶CFU/片，保证菌液接种量、洗脱流程有效；

　　两项质控指标全部达标，整套试验数据才可用于产品备案、性能宣称。