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新闻资讯 技术文章 抗皱化妆品功效体外试验介绍:弹性蛋白酶抑制率检测法
抗皱化妆品功效体外试验介绍:弹性蛋白酶抑制率检测法
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  • 2024-06-24

    抗皱化妆品即指可以淡化或减少皱纹的化妆品,亦称为抗皱护肤品,在这类化妆品中添加了抗皱活性物质,如视黄醇及衍生物、小分子多肽、一些植物提取物或发酵产物提取物等。


    弹性蛋白酶作为具有极高选择性和专一性的蛋白分解酶,对许多氨基酸如甘氨酸、亮氨酸、丙氨酸、缬氨酸等含羧基的多肽键具有催化水解的作用,可以使结缔组织蛋白质中的弹性蛋白分解。弹性蛋白酶抑制剂能够有效抑制弹性蛋白酶活性,减慢弹性蛋白的降解速度,起到延缓衰老、减少皱纹的作用。


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    中科检测是专业的化妆品检测与功效评价中心,经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作,可提供化妆品抗皱功效检测服务。


    抗皱功效评价试验目的和原理


    抗皱功效主要通过评估试验样品对弹性蛋白酶的抑制率来表征。弹性蛋白酶主要由成纤维细胞合成分泌,能够降解皮肤中的弹性蛋白导致皮肤老化。抑制弹性蛋白酶的实验原理是猪胰腺弹性蛋白酶与酶底物发生催化反应,添加活性物质后吸光度发生变化,通过吸光度变化的大小反映弹性蛋白酶抑制剂抑制率大小。


    本试验参考实验室方法(HMC-WI-028弹性蛋白酶抑制率),将试验样品与阴性对照进行弹性蛋白酶抑制率试验结果比对,如试验样品的抑制率高于阴性对照的抑制率且具有显著性差异(P<0.05),则可认为试验样品具有一定的抗皱功效。


    本试验方法为体外法,适用于评估宣称通过抑制弹性蛋白酶而达到抗皱效果的化妆品。


    抗皱功效评价试验指标


    样品弹性蛋白酶抑制率高于阴性对照且具有显著性差异(P<0.05),则可认为试验样品具有一定的抗皱功效。


    抗皱功效评价试验材料与方法


    1、仪器设备


    BSA224S分析天平


    RT-6100酶标分析仪


    2、试剂


    弹性蛋白酶(猪胰),BR


    N-琥珀酰-L-丙氨酰-L-丙氨酰-工-丙氨酸,98%


    表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG),98%


    3、试验方法


    (1)对照物及试验样品的处理


    XXX抗皱面霜:用纯水稀释至样品浓度为0.1%;


    阳性对照物(EGCG):用水稀释至阳性对照物浓度为0.1%;


    阴性对照物:纯水。


    (2)试验操作步骤


    设立样品组、样品本底组、溶剂组和溶剂本底组,每个组别需设立3个平行,在96孔板中分别加入不同试剂溶液,轻轻摇匀,25℃孵育15min,将其放在酶标仪中,在410nm处测定吸光值。


    抗皱功效评价报告


    检测单位:中科检测技术服务(广州)股份有限公司


    报告编号:XXXXXXXXXXXXX


    日期:2023年5月X日


    委托单位:广州XX化妆品有限公司


    样品名称:XXX抗皱面霜


    检测项目:化妆品抗皱功效评价


    检测依据:HMC-WI-028弹性蛋白酶抑制率(实验室方法)


    检测结果:阳性对照弹性蛋白酶抑制率>50%,反应体系有效,当样品稀释成0.1%水溶液时,弹性蛋白酶抑制率平均值为15.842%,与阴性对照相比具有显著性差异(P<0.05),表明样品有一定的抗皱功效。