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化妆品舒缓功效评价测试方法介绍:体外实验方法有哪些?
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  • 2024-09-03

    舒缓功效是指化妆品在使用后, 能够有效地减轻或缓解皮肤由于各种原因(如环境因素、 化学物质、 物理刺激等) 产生的不适感, 如红肿、 瘙痒、 刺痛、 灼热等。 舒缓功效的实现, 通常依赖于化妆品中特定的活性成分, 这些成分能够与皮肤发生作用, 调节皮肤状态, 减轻不适。




    舒缓功效作为化妆品的一大重要功能, 其实证研究在近年来得到了广泛的关注。 化妆品舒缓功效测试方法中的体外实验方法包括物理化学法、生物化学法、细胞生物学法、三维重组皮肤模型替代法等。


    作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的化妆品舒缓功效测试报告。


    舒缓功效测试:物理化学法


    物理化学法是通过检测化妆品的物理性能和特定化学成分含量来评价其效果的便捷手段, 目 前在化妆品舒缓功效评价方面多为特定功效成分的定性定量检测。


    神经酰胺即 N - 脂酰基(神经) 鞘氨醇, 是人体皮肤脂质的重要成分, 有保湿、维持角质层结构稳定(粘合) 、损伤修复等功能, 其性质和数量影响着皮肤屏障的稳固及部分皮肤病的发生。 目 前已经有较为系统的皮肤角 质层取样法、 液相 色谱法、 电离喷雾质谱法(ESI - MS) 、大气压化学电离质谱法(APCI - MS) 、串联质谱法(MS - MS) 等分析法 。


    舒缓功效测试:生物化学法


    生物化学法是借助光谱分析、 电子显微镜以及其他物理、化学技术手段, 对影响功效的特征指标(如自由基) 、重要生物分子(如蛋白质等) 含量进行测试分析的一种方法。 在抗炎抗敏的功效评价中常用的生物化学实验有透明质酸酶抑制实验及自 由基清除实验等, 也有部分研究人员使用红细胞溶血试验。


    1、透明质酸酶抑制实验。


    透明质酸 ( hyaluronicacid, HA) 是细胞外基质(extracellular matrix, ECM) 中含量最多、所占比例最大的成分, 可维持细胞外基质体积, 调控细胞生长因子和细胞因子的分泌, 影响细胞的粘附、生长、增殖和分化, 因而在维持皮肤水分和弹性、创伤愈合和血管形成等过程中 起着重要的作用。HAase 是透明质酸的特异性裂解酶, 抑制 HAase 的活性可保证 HA 含量和功能正常。 因此可以以 HAase 抑制率为指标评价物质的抗过敏活性, HAase 抑制率越大则抗过敏活性越强。


    2、自由基清除实验。


    线粒体在电子传递的过程中产生的自由基会攻击细胞膜、 蛋白质甚至 DNA [13] , 导致细胞的衰老甚至死亡, 抑制自 由基活性可以有效缓解由外界刺激产生的过量自由基所导致的细胞结构功能退化, 进而维护皮肤的正常屏障结构。自 由基清除实验 用于检测包括酶类、维生素类及多酚、黄酮等各种小分子抗氧化剂的抗氧化功效。


    3、红细胞溶血试验(RBC hemolysis test) 。


    红细胞溶血试验是欧洲替代方法验证中心(ECVAM) 建立的预测皮肤刺激性的动物替代实验方法, 其原理在于测定从红细胞中漏出的血红蛋白的量来评价细胞膜的损伤程度, 血红蛋白漏出量越多,细胞膜的损伤越大 。 改良的 RBC 溶血实验, 是将在经过活性物质处理后加入刺激物质与未经过活性物质处理后加入刺激物质的 2 种情况的 RBC 溶血率进行比较, 可以评价活性物质是否具有保护细胞膜免受刺激物损伤的作用。


    舒缓功效测试:细胞生物学法


    细胞生物学是研究细胞结构、 功能及其生命规律的一门科学。 细胞生物学法通过建立细胞模型, 在体外模拟人体生理环境来培养细胞, 测量细胞接触受试物前后的变化来验证原料的功效性。


    通过对受试物质的抗炎作用进行功效评价, 可以了解其对敏感性皮肤接触外界刺激物质或过敏原时发生的不良反应是否具有抑制作用, 包括受试物质对皮肤炎症反应各个环节的关键因素发挥作用, 主要包括各种细胞炎症因子的释放及其表达量的变化, 肥大细胞数量及其分泌组胺、白三烯等炎性物质的含量, 皮肤抗原提呈细胞———朗格汉斯细胞活力等。


    舒缓功效测试:三维重组皮肤模型替代法


    三维重组皮肤模型替代法是利用组织工程技术,将人源皮肤细胞培养于特殊的插入式培养皿上构建的具有三维结构的人工皮肤组织模型, 用其替代动物模型进行实验的一种方法。 三维重组皮肤模型为化妆品安全性、功效性评价提供了新的技术手段。


    三维重组皮肤模型具有与真人皮肤高度相似的皮肤结构, 不仅能用于化妆品的安全性测试, 还可以用于配方产品中功效原料的皮肤吸收和作用机制研究, 以及分析不同细胞间的相互作用, 提供原料或配方产品从安全到功效的全方位整合信息。 利用皮肤模型进行化妆品功效评价的主要优势包括: 具有完整的角质层,不同理化性质的受试物(疏水性物质或固体、 混合物或配方产品) 均可应用于皮肤模型; 试验条件精确可控, 数据易于定量并具有较好的重复性; 试验周期较短, 相对于动物和人体试验的时间和经济成本降低; 有效地减少了实验动物的使用。