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新闻资讯 技术文章 舒缓功效评价方法介绍:斑马鱼刺痛舒缓测试方法
舒缓功效评价方法介绍:斑马鱼刺痛舒缓测试方法
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  • 2024-09-05

    敏感性皮肤(sensitive skin, SS) 特指皮肤在生理或病理条件下发生的一种高反应状态, 主要发生于面部,临床表现为受到物理、化学、精神等因素刺激时皮肤易出现灼热、刺痛、瘙痒及紧绷感等主观症状, 伴或不伴红斑、鳞屑、 毛细血管扩张等客观体征 。 随着环境污染日 益加重和精神压力 增大等原因, 敏感性皮肤的发生率逐渐升高, 其越来越受到人们的重视。针对这类皮肤,舒缓功效成为了一种关键的属性, 能够让消费者购买到更安全、 更舒适、 更符合个人肤质的化妆品, 有助于防止过敏,维持肌肤健康。



    在化妆品领域中, 舒缓功效指的是化妆品产品所添加的一系列有效成分, 在大部分人群的使用后能够有效地缓解和平息肌肤受到刺激、 发红、 瘙痒等问题, 减轻肌肤不适, 并促进肌肤的愈合发挥的作用。


    作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的化妆品舒缓功效评价报告。


    舒缓功效评价指标


    化妆品舒缓功效的评价指标主要包括以下几个方面:


    1.局部皮肤红肿程度测定。 通过量表或相关设备检测皮肤发红、 红肿的程度, 从而评价舒缓效果的好坏。 比如用 Redness Score、 DSI 等指数来评价。


    2.皮肤保护作用的测定。 通过皮肤通透度的测定来评价化妆品在保护肌肤屏障方面的效果。


    3.皮肤自由基消除能力测定。 通过测量抗氧化剂的清除自由基能力、总抗氧化指数等来评价化妆品的舒缓效果。


    4.皮肤镇静舒缓作用的测定。 通过相关实验室测定, 确定化妆品的成分能否在肌肤表面起到镇静舒缓作用。


    5.用户测试。 通过面向大众的问卷调查物品、 用户满意度调查等方式, 直观收集和整理消费者的反馈意见, 从而判断舒缓功效的好坏。


    以上五个指标的使用会根据具体问题而有所不同。


    舒缓功效评价测试仪器


    测试仪器包括但不限于:


    a) 经表皮失水率测试仪;


    b) 皮肤角质层水分测试仪;


    c) 皮肤红度测量设备;


    d) 皮肤油脂测试仪;


    e) 皮肤酸碱度测试仪。


    斑马鱼刺痛舒缓测试方法


    1、测试原理


    化妆品会通过激活辣椒素通路(TRPV1)引起皮肤刺痛。人体皮肤上的辣椒素通路可以通过辣椒素酸性(pH<6.05)及温度高于42℃时被激活。


    斑马鱼也有辣椒素通路,且也能在高温度时被激活,在37℃或以上时达到高峰,表现为游动速度显著增快。因此,应用高温激活的斑马鱼非常适合用于测试舒缓刺痛测试。


    应用软件测量斑马鱼运动距离,比较受试物处理组和模型对照组斑马鱼运动距离变化,计算运动距离减短率以评价原料或产品的刺痛舒缓效果。


    2、测试步骤


    以下测试步骤是96-孔板测试指引。测试流程可参见附录A图A.如应用更大的测试容器(如24-孔板或培养皿),测试指引需做相应调整。


    挑选健康的受精后5天大的斑马鱼。


    1)测试分组


    测试需设定空白对照组(鱼培养液)、阳性对照组(三卡因工作液)和受试物组(受试物溶液)


    空白对照组设置


    随机挑选16尾斑马鱼,转移至96-孔板中,每孔含1尾鱼和0.2m鱼培养液。


    阳性对照组设置


    随机挑选16尾斑马鱼,转移至96-孔板中,每孔含1尾鱼和0.2mL4-叔丁基环已醇溶液受试物处理


    随机挑选16尾斑马鱼,转移至96-孔板中,每孔含1尾鱼和0.2mL受试物溶液。


    放置于28±1℃恒温箱中2±0.2h。


    2)游动轨迹剂量和测量


    然后放入已预热至38±1℃斑马鱼运动记录仪(DanioVision,NoldusInformation Technology)中,用红外线追踪软件EthoVisionXT记录黑暗环境下每尾斑马鱼在5min内的游动轨迹。将每孔中的0.18mL溶液替换为鱼培养液,然后放置于28士1℃恒温箱中24±1h后统计斑马鱼存活率。


    3)数据和结果计算


    量读每孔的像素强度作为每尾斑马鱼的运动距离。


    3、结果报告


    1、 ROS清除率


    受试物在对应测试浓度下对斑马鱼刺痛的舒缓率。


    2、 评价


    评价受试物舒缓刺痛的能力,分析受试物处理组与模型对照组的检测值是否具有统计学差异(p<0.05)。


    在刺痛舒缓率为正数且具有统计学差异(0.05)情况下,测试结果可作为受试物具有舒缓刺痛效果的支持证据,支撑舒缓功效宣称。