在各国法律法规和科技发展的驱动下，兔眼实验替代方法的研究成为毋庸置疑的科学界、政府机构和企业发展方向的热点。寻求最合理合适的替代方法，就必须先了解兔眼刺激性和腐蚀性的产生机制。眼刺激作用的发生是、角膜、膜虹、结膜以及泪腺等眼球结构共同参与的过程，其受累范围反映了眼刺激作用的严重程度。眼结膜是身体上最脆弱的粘膜，含有丰富的微血管及毛细血管，不含神经：角膜没有血管但是含有丰富的神经，是身体痛觉和触觉最敏感的区域；泪腺连接眼结膜，对气体更加敏感。

　　作为第三方检测中心，中科测试机构拥有CMA和CNAS认证检测资质，检测设备齐全，数据科学可靠，可出具国家认可的化妆品眼刺激性试验报告。

　　鸡胚绒毛尿囊膜试验

　　鸡胚的绒毛尿囊膜（CAM）是具有完整的响应损伤炎症反应过程的组织，这一过程类似于在物质刺激免眼，使其组织发炎的过程。在 HET-CAM 试验系统中，有三种反应评价指标即出血，血和凝血（有时也充血）。但不能体现神经组织和疼痛感。将待测样本直接放置于CAM，反应5分钟，观察以上反应指标的变化程度。反应时间法是目前使用最广的做法，即待上述反应指标终点全部出现时记下各个出现的时间点。还有一种方法是刺激值法该方法改变测试材料的浓度，直到这些指标被首次观察到。上述两种方法主要用于透明物质的测试，而非透明不溶固体的物质可用第三方法，即测试样品可以通过暴露在 CAM-固定时间内使用，然后经过小心仔细冲洗测试样品，再观察反应上述指标终点。该试验操作简单，观察方便，十分适合轻度和无刺激样品的检测。但不大适合有颜色，不溶性非透明的物质的检测，干扰终点的测定。另外，实验存在难量化和主观性的缺点，这种情况下可利用测定 CAM 吸收苔盼蓝的量来检测受试物损伤程度来克服该问题，即绒毛膜尿囊膜苔盼蓝染色试验（chicken chorioallantoicmembrane-trypan blue staining，CAM-TB）。

　　红细胞溶血性试验

　　红细胞溶血性试验（Red blood cell haemolysis test，RBC）实验是现成的，具有长期科学研究等离子体膜溶解历史的试验，被发展用于评估原始细胞受具体化合物刺激的反应。RBC 试验基于测量受试物诱导红细胞溶血和血红蛋白变性（HD）通过溶血浓度和 HD 计算 LD 的比值，此值可用于划分受试物潜在的眼部刺激性的等级。红细胞测试被验证可替代急性刺激物的Draize 眼刺激试验，如典型的基于表面活性剂的配方和原料的测试。红细胞试验的机理清晰，操作方法简单，不需要任何特殊的技术或设备，与体内方法具有良好的相关性，并且是特别适用于表面活性剂的研究和含有表面活性剂的清洁产品。缺点是对免血的新鲜程度和保存条件有要求，且不适合有颜色或不溶性的物质。与 HET-CAM 相比，HET-CAM 倾向于高估体内的结果，红细胞测定显示更容易评估低刺激性产品。

　　鸡胚尿囊膜血管试验

　　鸡胚尿囊膜血管试验（Chorioallantoic membrane vascular assay，CAMVA） 利用鸡蛋受精卵绒毛尿囊膜上的血管变化来评价刺激性。CAM 上的血管变化类似于结膜时发生的变化，即毛细管充血，血流的损失和出血等。受试物直接接触 CAM 的小片区域，30分钟后观察血管反应，每个CAM 被单独记为正常或不正常来打分，每个浓度做十组试验并作概率分析。得到的结果 RC50值被用于判定该材料是否具有眼刺激的潜力。

　　从医学构造来看CAM 和眼结膜都是通过血管和血液变化表现刺激CAMVA 可以模拟眼结膜刺激。CAMVA 常用作初始筛选试验，检验受试物是否具有轻度刺激或中度刺激性。CAMVA 试验操作简单，用时短有良好的眼刺激实验相关性。适用于水溶性和脂溶性物质的检测也可用于低刺激性的化妆品配方产品，表面活性剂的检验。但不适于严重刺激或腐蚀性的物质检测。

　　重组人角膜上皮模型试验

　　重组人角膜上皮模型试验（Human coreal epithelium models，RhCE）是基于正常人的表皮角质细胞，经培养形成一个高度分化分层的、类似于人类角膜的鳞状上皮组织。该组织至少有3 层具有生命活性和表面无角质化。将受试物应用于这样的三维 RhCE 组织，经过暴露和恒温后处理，主要用 MTT 检测并得出ET50 值（即组织活性降低50%的有效暴露时间）来检测受试物的在眼刺激性。

　　另外，也可以用 LDH释放测定组织活性、组织学观察、细胞因子释放定量和基因表达作为测试终点227一般用于极轻度至中度眼刺激性物质的检测。该试验适用范围广，可用于固体，液体，半固体和蜡类物质的检测，并且具有高度体内实验相关性。缺点是不适用于联合国 GHS 分类系统中严重眼损伤物质的检测。