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化妆品抗皱功效测试方法介绍:抗皱功效评价专业测试机构
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  • 2024-06-26

    抗皱化妆品即指可以淡化或减少皱纹的化妆品,亦称为抗皱护肤品,在这类化妆品中添加了抗皱活性物质,如视黄醇及衍生物、小分子多肽、一些植物提取物或发酵产物提取物等。


    抗皱功效评价是指对使用某款护肤产品或某种医学处理方式达到的抗皱效果,可以从体外法和在体法等多方面进行评价验证。常规的评价方法包括对皮肤水分、弹性、纹理等指标的测量,以及通过医学影像技术对真皮层厚度和皱褶深度等参数进行分析。所有这些评价指标都需要基于科学严谨的测试和数据处理,才能够客观、全面地评价化妆品的抗皱功效。


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    中科检测是专业的化妆品检测与功效评价中心,经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作,可提供化妆品抗皱功效评价试验服务。


    一、生化测试


    (一)金属蛋白酶抑制


    抑制基质金属蛋白酶(MMP,MatrixMetalloProteinase)的实验方法有荧光底物法、酶联免疫测定法、明胶酶谱法、高效液相色谱法、毛细血管电泳法等。王艳春等将基质金属蛋白酶1uL和不同浓度的覆盆子提取物1uL加入到缓冲溶液中,体积为50uL;对照组不加入覆盆子水提物溶液;用荧光酶标仪检测荧光强度,计算出不同浓度覆盆子提取物对MMP-13的抑制百分率。结果显示覆盆子水提物浓度与MMP-13活性抑制百分数呈正比关系,说明覆盆子水提物具有抑制MMP-13活性的作用。


    (二)弹性蛋白酶抑制


    抑制弹性蛋白酶实验通常是研究活性成分对猪胰腺弹性蛋白酶IV型与底物N-succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide催化反应的抑制作用,抑制率大小通过吸光度变化反映。Kim等用Tris-Cl缓冲液配制成底物N-succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide,然后加入猪胰腺弹性蛋白酶,25ºC条件下孵育10min后,在410nm下测定吸光度。研究发现莲的叶、种子和花提取物对弹性蛋白酶的抑制率可达50%左右。


    二、细胞测试


    (一)MMP-1含量测试


    基本原理:MMP-1是降解I型和III型胶原最主要的酶,当皮肤细胞过量表达MMP-1,真皮层细胞外基质的结果被严重破坏,尤其是胶原纤维和弹力纤维的正常结构。通过紫外线诱导人皮肤成纤维细胞的体外早衰模型,通过检测细胞外基质中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)含量,评估受试物抗皱作用。


    实验步骤:


    1、细胞活性测试。


    2、MMP-1含量测定:将正常人皮肤成纤维细胞接种到24孔板。PBS清洗细胞层,根据分组加入含有不同浓度受试物的维持培养基和不含样品的的维持培养基。去除含待测物质的培养基和不含样品的的维持培养基,用PBS清洗次后,少量PBS覆盖,UV照射人皮肤成纤维细胞。辐照结束后,用PBS清洗细胞,阴性对照组、模型对照组更换为维持培养液,其余各组加入含样本或阳性对照的维持培养液。收集细胞上清液,-80℃保存,采用ELISA试剂盒测定MMP-1含量。


    3、数据分析数据采用SPSS进行分析,并以均值±标准差表示,如果p<0.05考虑差异具有统计学意义。


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