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新闻资讯 技术文章 化妆品紧致功效测试方法是什么?如何评价化妆品紧致功效是否有效?
化妆品紧致功效测试方法是什么?如何评价化妆品紧致功效是否有效?
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  • 2024-06-26

    紧致功效的释义:有助于保持皮肤的紧实度、弹性;紧致功效宣称测定的原理主要包括吸力法、压力法、扭力法和弹道测量法等。


    《化妆品功效宣称规范》中指出,具有紧致功效的化妆品,可在人体功效评价测试、消费者使用测试和实验室试验三者中任选一种进行测试,出具报告后方可进行功效宣称。


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    中科检测日化部利用自身优质的实验室运营服务模式、结合完善的技术保障服务,致力于提供化妆品原料及产品的安全性和功效性的科研、标准、咨询、评测和备案服务。通过包括全项人体功效评价试验、消费者使用试验及实验室方法等技术手段,为化妆品企业功效宣传提供科学依据,助力化妆品产品研发、质量提升和升级转型。


    一、生化测试


    胶原蛋白和弹性蛋白含量下降,导致皮肤松弛、下垂、皱纹等临床老化症状。弹性蛋白酶以水解不溶性弹性蛋白为特性,同时也能分解酪蛋白、明胶、血红蛋白等多种广谱性蛋白的水解酶。因此抑制弹性蛋白酶的分泌,可减少弹性蛋白的降解。通过细胞评价供试品是否能够抑制弹性蛋白酶的分泌,判断该供试品具有紧致功效。


    采用人皮肤成纤维细胞,细胞稳定生长后进行消化,制备为单细胞悬液,进行细胞计数后接种2×104个细胞/孔至96孔板中培养(37℃、5%CO2、24h),分别设置模型对照组、样品组,24h后,将浓度为2%、1%的样品加入到相应的分组内,给药1h后,按照光照强度2.0mW/cm2,光照剂量100mJ/cm2进行造模,结束后,将96孔板里的培养基用200μL的新鲜培养基进行替换,24h后,每孔取200μL培养上清液,按ELISA试剂盒操作说明检测弹性蛋白酶的含量。


    二、细胞测试


    (一)Elastin含量测试


    基本原理:弹性蛋白是一种存在于多种结缔组织中并具有独特生理弹性的蛋白质。尽管弹性蛋白仅占真皮总蛋白的2%,但它促进了皮肤稳态的重要功能。皮肤光老化的分子机制之一,是UV辐射可以调控弹性蛋白酶基因表达,导致弹性蛋白含量减少,如基质金属蛋白酶(MMP),特别是人巨噬细胞金属弹性蛋白酶(MMP12),它是弹性蛋白降解中最活跃的蛋白酶。同时弹性蛋白的产生随着年龄的增长或太阳辐射造成的损害而减少。本实验通过ELISA法测定弹性蛋白含量变化,评价待测物的紧致功效。


    实验步骤:


    1、细胞活性测试


    2、Elastin含量测定:将正常人皮肤成纤维细胞接种到96孔板。PBS清洗细胞层,根据分组加入含有不同浓度受试物的维持培养基和不含样品的的维持培养基。收集细胞上清液,-80℃保存,采用ELISA试剂盒测定Elastin含量。


    阴性对照组(NT):FBSDMEM


    待测样品组(TA):含3个浓度样品的FBSDMEM


    阳性对照组(PC):含阳性对照物的FBSDMEM


    3、数据分析数据采用SPSS进行分析,并以均值±标准差表示,如果p<0.05考虑差异具有统计学意义。


    (二)Procollagen-1含量测试


    基本原理:I型胶原蛋白是皮肤中含量最丰富的蛋白质,I型和III型胶原纤维含量决定了皮肤的强度和弹性,I型前胶原蛋白(procollagen-1)则是I型胶原蛋白的前体。皮肤光老化的分子机制之一,是UV辐射可以通过调控I型和III型前胶原的基因表达,导致前胶原蛋白含量减少。此外,UV辐射还可以上调外基质金属蛋白酶(MMPs)活性,促进胶原蛋白的分解。


    实验步骤:


    1、细胞活性测试。


    2、Procollagen-1含量测定:将正常人皮肤成纤维细胞接种到96孔板。PBS清洗细胞层,根据分组加入含有不同浓度受试物的维持培养基和不含样品的的维持培养基。收集细胞上清液,-80℃保存,采用ELISA试剂盒测定Procollagen-1含量。


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