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抗菌材料测试知识分享:如何做好材料抗菌实验
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  • 2023-08-14

抗菌材料测试就是测试一些材料对微生物的抑止作用。抗菌测试按照菌种分类可以分为两大类,即:细菌测试和霉菌测试。目前随着抗菌材料的不断更新发展,测试方法也相应发展。目前很多新的材料:纳米材料、光催化材料等都具有一定的抗菌性能。



作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的抗菌材料测试报告。


细菌浓度多少最好?


答:最好的细菌浓度不是一个定值,一般是依据不同的抗菌检测目的和材料本身抗菌性能的优劣,选择对应的细菌浓度。例如做杀菌实验时,选择的细菌浓度会稍高一些(一般情况下≥106 CFU/mL),而做抑菌实验时,选择的细菌浓度会稍低一些(一般情况下104 -106 CFU/mL)。


如何做好材料抗菌实验?


答:材料抗菌实验成功与否影响因素比较多,一般与几个方面有关:检测方法、材料处理方式、细菌浓度、材料使用浓度、培养条件(温度/培养液/pH等)、培养时间等。


当样品在水中溶解性很好,但一旦加入细菌杀伤体系,立刻出现混浊,导致无法用OD判定生长,尤其是稍高浓度。原因可能是培养基中的成分与样品溶液发生反应,从而出现混浊现象。


优化方法:

①尝试更换样品溶剂;


②更换检测方法(比如菌落计数法,不受浊度的影响);


③尝试差速离心(前提是混浊物可以通过离心方式沉淀,分离出来)。


抗菌测试实验方法?


答:抗菌测试实验方法有抑菌圈、OD值、菌落计数、MIC/MBC、抗生物膜、激光共聚焦显微镜成像、流式细胞术、荧光定量PCR等。


抑菌圈/环实验比较良好的结果影响因素有菌液浓度、涂布菌液量、样品本身性质(适用于溶液/具有可溶出抗菌成分的样品)、样品浓度、加样量等。所以想要获得完美的结果,涂布菌液浓度不是最关键的,还需要注意控制其他几个方面的条件。


OD法测吸光度检测杀菌效果,怎么避免LB肉汤的影响?


答:可将菌悬液通过离心的方式,弃去上清培养液(LB肉汤等)。然后使用水/生理盐水/PBS等将菌体沉淀重悬,再通过测吸光度,来调节适合于本实验的菌液浓度。最后再行样本与一定菌液浓度的OD值法抗菌检测。


但此法对初始菌液浓度有一定的要求,也就是制备的菌悬液要有一定的浊度,即此时的菌液浓度较高。否则样品与菌悬液培养即使有抗菌效果,也无法通过培养前后OD值的差异性来判定。


测量菌液中菌浓度的方法是什么?


答:测量菌液中菌浓度的方法一般是菌落计数法(可明确定量,比如6.5×107 CFU/mL)和吸光度测定(一般只定位至数量级,比如≈108 CFU/mL)。


如何计算抑菌率?


答:抑菌率的计算公式为(对照组菌浓-实验组菌浓)/对照组菌浓*100%,即抑菌率是以菌液浓度的下降率来体现的,所以只要知晓不同稀释倍数下菌落数的多少,可以计算出相应抑菌率。相同的稀释倍数,是基于相同稀释倍数下均长出一定数量的菌落,这样才可以使用同一稀释倍数下菌落数来计算抑菌率。