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新闻资讯 技术文章 一次性使用卫生用品微生物检测方法详解:大肠菌群检测、绿脓杆菌检测等等
一次性使用卫生用品微生物检测方法详解:大肠菌群检测、绿脓杆菌检测等等
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  • 2023-08-25

一次性使用卫生用品包含的产品有很多,从概念上讲,一次性使用卫生用品就是指那些可以使用一次后丢弃的产品,这些产品的作用多是为了达到人体生理卫生或卫生保健的目的。一次性使用卫生用品可以是与人体直接接触或间接接触的,可以是固体或液体,也可以抗菌或抑菌的产品。



作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的一次性使用卫生用品微生物检测报告。


大肠菌群检测方法


1)操作步骤


取样液5mL接种50mL乳糖胆盐发酵管,置35℃±2℃培养24比如不产酸也不产气,则报告为大肠菌群阴性。


如产酸产气,则划线接种伊红美蓝琼脂平板,置35℃±2℃培养18~24h,观察平板上菌落形态。典型的大肠菌群为黑紫色或红紫色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润,常具有金属光泽,也有的呈紫黑色,不带或略带金属光泽,或粉红色,中心较深的菌落.


取疑似菌落1~2个作革兰氏染色镜检,同时接种乳糖发酵管,置35℃±2℃培养24h,观察产气情况。


2)结果报告


凡乳糖胆盐发酵管产酸产气.乳糖发酵管产酸产气,在伊红美蓝平板上有典型大肠菌落,革兰氏染色为阴性,可报告被检样品检出大肠杆菌。


绿脓杆菌检测方法


1)操作步骤


取样液5ml,加人到50mLSCDLP培养液中,充分混匀,置35℃±2℃培养18~24h如有绿脓杆菌生长,培养液表面呈现一层薄菌膜,培养液常呈黄绿色或蓝绿色。


从培养液的薄菌膜处挑取培养物,划线接种十六炾三甲基漠化钦琼脂平板,置35℃±2℃培养18~24h,观察菌落特征。


绿脓杆菌在此培养基上生长良好,菌落扁平边缘不整,菌落周围培养基略带粉红色,其他菌不长。


取可疑菌落涂片作革兰氏染色.镜检为革兰氏阴性菌者应进行下列试验:


氧化酶试验、绿脓菌素试验、硝酸盐还原产气试验、明胶液化试验、42℃生长试验


绿脓菌素试验:取2~3个可疑菌落,分别接种在绿脓菌素测定用培养基斜面,35℃±2℃培养24h,加人三氯甲烧3~5mL,充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解,待三氯甲烧呈蓝色时,用吸管移到另一试管中并加入1mol/L的盐酸1mL,振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性,表示有绿脓菌素存在。


2)结果报告


氧化酶及绿脓杆菌试验均为阳性者,即可报告被检样品中检出绿脓杆菌。


如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为阳性时,仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。


金黄色葡萄球菌检测方法


1)操作步骤


取样液5mL,加入到50mLSCDLP培养液中,充分混匀,置35℃±2℃培养24h。


自上述增菌液中取1~2接种环,划线接种在血琼脂培养基上,置35℃±2℃培养24~48h在血琼脂平板上该菌落呈金黄色.大而突起,圆形,不透明,表面光滑,周围有溶血圈。


挑取典型菌落,涂片作革兰氏染色镜检,金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌,排列成葡萄状,无芽胞与荚膜。镜检符合上述情况,应进行下列试验:


甘露醇发酵试验:取上述菌落接种甘露醇培养液,置35℃±2℃培养24h,发酵甘露醇产酸者为阳性。


血浆凝固酶试验:玻片法:取清洁干燥载玻片,一端滴加一滴生理盐水,另一端滴加一滴兔血浆.挑取菌洛分别与生理盐水和血浆混合,5min如血浆内出现团块或颗粒状凝块,而盐水滴仍呈均匀混浊无 凝固则为阳性,如两者均无凝固则为阴性。凡盐水滴与血浆滴均有凝固现象,再进行试管凝固酶试验;


试管法:吸取1:4新鲜血浆0.5ml,放灭菌小试管中,加人等量待检菌24h肉汤培养物0.5mL。混匀,放35℃±2℃温箱或水浴中.每半小时观察一次.24h之内呈现凝块即为阳性。同时以已知血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养物各0.5mL作为阳性与阴性对照。


2)结果报告


凡在琼脂平板上有可疑菌落生长,镜检为革兰氏阳性葡萄球菌,并能发酵甘露醇产酸,血浆凝固酶试验阳性者,可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。


溶血性链球菌检测方法


1)操作步骤


取样液5mL加入到50mL葡萄糖肉汤,35℃±2℃培养24h。


将培养物划线接种血琼脂平板,35℃±2℃培养24h观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色,半透明或不透明,针尖状突起,表面光滑,边缘整齐,周围有无色透明溶血圈。


挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检,应为革兰氏阳性,呈链状排列的球菌.镜检符合上述情况,应进行下列试验:


链激酶试验:吸取草酸钾血浆0.2rnL(0.01g草酸钾加5mL兔血浆混匀,经离心沉淀.吸取上清液),加人0,8mL灭菌生理盐水,混匀后再加入待检菌24h肉汤培养物0.5mL和0.25%氯化钙0.25ml,混匀放35℃±2℃水浴中,2min观察一次(一般10min内可凝固),待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2h内不溶化,继续放置24h观察,如凝块全部溶化为阳性,24h仍不溶化为阴性。


杆菌肤敏感试验:将被检菌菌液涂布血平板上,用灭菌摄子取每片含0.04单位杆菌肤的纸片放在平板表面上,同时以已知阳性菌株作对照,在35℃±2℃下放置18~24h,有抑菌带者为阳性。


2)结果报告


镜检革兰氏阳性链状排列球菌,血平板上呈现溶血圈链激酶和杆菌肽试验阳性.可报告被检样品检出溶血性链球菌。


真菌菌落总数检测方法


1)操作步骤


待上述生理盐水样液自然沉降后取上清液作真菌计数。共接种5个平皿,每个平皿中加入1mL样液,然后用冷却至45℃左右的熔化的沙氏琼脂培养基15~25mL倒人每个平皿内混合均匀,琼脂凝固后翻转平皿置25℃±2℃培养7天,分别于3、5、7天观察,计算平板上的菌落数,如果发现菌落蔓延,以前一次的菌落计数为准.


2)结果报告


当菌落数在100以内,按实有数报告,大于100时采用二位有效数字。


如果样品菌落总数超过本标准的规定,进行复检和结果报告。


3)复检方法


将留存的复检样品依前法复测2次,2次结果都达到本标准的规定,则判定被检样品合格;其中有任何1次结果超过本标准规定,则判定被检样品不合格。


真菌定性检测方法


1)操作步骤


取样液5mL加入到50mL沙氏培养基中、25℃±2℃培养7天,逐日观察有无真菌生长。


2)结果报告


培养管混浊应转种沙氏琼脂培养基,证实有真菌生长,可报告被检样品检出真菌。


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