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化妆品美白功效评价方法:体外测试方法和人体评价方法盘点
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  • 2024-06-24

    目前,国内外对化妆品美白功效没有统一的评价标准,通常可根据产品的美白机制和作用途径,选择不同的评价方法,从图像、相关指标数据、志愿者或专家主观评估等方面,对产品的美白功效进行评价。


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    中科检测是专业的化妆品检测与功效评价中心,经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作,可提供化妆美白功效评价、化妆品安全性评价、化妆品安全检测等化妆品安全相关服务。


    化妆品体外测试方法


    酪氨酸酶活性抑制实验


    人体肤色的差异主要取决于黑色素的含量及分布。酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶,其活性决定黑色素形成的数量。化妆品对酪氨酸酶活性抑制作用的强弱,可作为评价产品美白功效的参考指标。


    该实验利用从蘑菇中提取的酪氨酸酶,以L-酪氨酸或L-多巴为底物,加入受试物、酪氨酸酶等进行反应,然后测量其吸光值,计算得到酪氨酸酶抑制率,评估受试物对酪氨酸酶活性的抑制作用,评价其美白功效。


    抗氧化实验


    紫外线、体内代谢等因素会促使机体产生自由基。自由基可直接或间接调控酪氨酸酶的表达,加速皮肤黑色素的产生。抑制自由基的产生从一定程度上可抑制黑色素的产生,因此,可通过测试样品对自由基的抑制率,评价其美白功效。


    黑色素细胞中的黑色素含量测定实验


    黑色素细胞是机体形成、分泌黑色素的细胞,通过细胞生物学法测定黑色素细胞中的黑色素含量,是检测化妆品美白功效的有效方法。


    该实验多通过在体外培养特定的黑色素瘤细胞模型,采用分光光度法、图像分析技术等,测试细胞内酪氨酸酶活性及黑色素含量,对受试物的美白功效进行评价。为更好模拟人皮肤中黑色素细胞的生长、黑色素的分泌,现在还常常采用黑色素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型。


    角质形成细胞黑色素摄取实验


    黑色素生成后,需要转移才能到达表皮层,因此,可以通过测试受试物抑制黑色素小体转移的情况,评价其美白功效。


    该实验先在正常人表皮角质形成细胞培养基中加入受试物,然后加入带有荧光剂的黑色素颗粒,孵化4小时后,测量培养基中剩余荧光剂的剂量,考察受试物对黑色素小体转移的抑制效果。


    非酶糖基化抑制实验


    皮肤变黄和出现色斑的主要原因是脂质过氧化和非酶糖基化反应。其中,生物体内的非酶糖基化反应可生成高级糖基化终产物(AGEs)。AGEs为棕色或黑色的大分子物质,导致皮肤发黄、产生褐斑。


    该实验通过在体外模拟体内蛋白质非酶糖基化的过程,测试受试物抑制AGEs生成的能力,评价其美白功效。


    重组皮肤模型替代法


    三维重组皮肤模型是利用组织工程技术,将人的皮肤细胞(含黑色素细胞)在培养皿中培养,构建具有三维结构的人工皮肤组织模型。


    该方法在三维重组皮肤模型上涂抹受试物后,测定模型组织的酪氨酸酶活性、黑色素含量及相关酶的表达,表征受试物对黑色素的抑制作用。


    化妆品人体评价方法


    皮肤颜色测试


    该方法利用仪器采集受试者使用化妆品前后的皮肤状态参数,并以数据或图片的形式呈现,可最大程度消除人为因素影响。目前,常用来评价皮肤颜色的探头式仪器有Skin-colorimeterCL400和ChromameterCR-400。这两种探头式仪器均应用反射分光光度法,通过检测皮肤表层结构上的紫外可见反射光,采用三维颜色空间分量的定量,模拟并还原描述人肉眼看到的物体颜色,经过计算,综合评价皮肤色度。


    皮肤红黑色素测试


    人类皮肤的颜色主要取决于人体皮肤中黑色素和血红素的含量。MexameterMx18是常用的测定皮肤色度的仪器,其结果输出以黑色素指数和红斑指数表示,黑色素指数越高,说明皮肤中所含的黑色素越多。


    皮肤黑色素含量测试


    该测试是一种客观的分析方法,使用光密度测量法,量化角质层中黑色素的含量。测试时,使用透明胶带将受试者的皮肤角质层剥离,用Fotana-Masson银给剥离的样品染色,然后将样品置于配有内部光密度计的显微镜下,测定样品的光透射率,并以220放大倍率拍摄。使用0~10级的灰度判别来评估颜色的密度,再通过计算,测定角质层细胞中的黑色素含量。


    皮肤光泽度测试


    光泽度是构成物质表面视觉特征的重要参数之一。皮肤光泽度直接关系到光线进入人眼时的视觉效果,所以测试使用化妆品前后的皮肤光泽度,在一定程度上可以评价产品的美白效果。目前,评价皮肤光泽度的仪器主要有Skin-GlossymeterGL200和GonioLux4D。


    VISIA拍照


    用VISIA拍照,通过分析图像可以评价化妆品的美白功效。常用的仪器设备有Visia和Visia-CR。对美白功效的评价,可选用标准光、UV光和交叉偏振光采集面部图像,并使用图像分析软件进行量化分析,以评估使用受试物前后皮肤颜色的变化。


    主观评价法


    主观评价法包括专家评估和志愿者自我评估两种方法。专家评估由经验丰富的专家,对志愿者使用受试物前后皮肤颜色的变化进行评分,评价受试物的美白效果。志愿者自我评估多采用调查问卷形式,由志愿者对使用受试物后肤色的改善情况进行评估。在实际操作中,主观评价法多与其他方法结合使用,以便更客观准确地评价化妆品的美白功效。