紧致功效化妆品是指含有促进胶原蛋白生成、提升肌肤弹性的成分，能够改善肌肤松弛和皱纹的外用产品。紧致功效化妆品可通过激活皮肤中的成纤维细胞，增强其合成胶原蛋白和弹性蛋白的能力，从而提高皮肤的弹性和紧致度。而弹性蛋白酶是一种能够分解弹性蛋白的酶，而弹性蛋白是皮肤结构中提供弹性的关键成分。随着年龄的增长或由于外部环境因素，弹性蛋白酶的活性可能增加，导致皮肤失去弹性和紧致性。

    弹性蛋白酶抑制率试验是一种实验室测试，用于评估化妆品产品或成分抑制弹性蛋白酶活性的能力。这种测试的结果可以作为衡量化妆品产品是否具有紧致功效的参考指标。如果一个化妆品产品能够显著提高弹性蛋白酶的抑制率，它可能有助于保护皮肤中的弹性蛋白，从而维持皮肤的紧致度和弹性。

    中科检测是专业的化妆品检测与功效评价中心，经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作，可提供化妆品紧致功效检测服务。

    试验目的和原理

    弹性蛋白酶具有降解胶原蛋白、弹性蛋白等多种蛋白质的能力。皮肤老化时弹性蛋白结构的改变是导致皱纹和皮肤松弛的重要原因之一，而抑制弹性蛋白酶分解弹性蛋白可以起到抗皱紧致的作用。弹性蛋白酶主要由成纤维细胞合成分泌，能够降解皮肤中的弹性蛋白导致皮肤老化。

    紧致功效可以通过评估试验样品对弹性蛋白酶的抑制率来表征。弹性蛋白酶抑制率数值越高，则反映该样品的紧致功效越好。

    弹性蛋白酶主要由成纤维细胞合成分泌，能够降解皮肤中的弹性蛋白导致皮肤老化。抑制弹性蛋白酶的实验原理是猪胰腺弹性蛋白酶与酶底物发生催化反应，添加活性物质后吸光度发生变化，通过吸光度变化的大小反映弹性蛋白酶抑制剂抑制率大小。

    适用范围及相关性

    本试验方法为体外法，适用于评估宣称通过抑制弹性蛋白酶而达到紧致抗皱效果的化妆品产品及原料。体外法作为人体主客观评判法的补充，其为在体皮肤弹性蛋白降解主要通路，与体内法测试紧致功效结果具有一定的相关性。

    通过试验设计，试验样品组与空白组进行弹性蛋白酶抑制率结果比对。重复三次，计算均值及标准偏差，体外紧致抗皱测试组间采用均值比较和方差分析。

    弹性蛋白酶抑制率试验指标

    样品组的弹性蛋白酶抑制率优于空白组且具有显著性差异（p≥0.05）。

    弹性蛋白酶抑制率试验方法

    (1)在样品管和祥品本底中各加入0.2m相同浓度的样品溶液，样品本底加入1.0mLpH8.8硼酸缓冲液，酶反应管加入0.2mLpH8.8硼酸缓冲液，溶剂本底加入1.0mLpH8.8硼酸缓冲液。

    (2)在祥品管和酶反应管中都分别加10mLAAPAN溶液和1.0mL，弹性蛋白酶。将混合液充分混匀，CN置恒温水浴摇床震荡20min。

    (3)样品管、样品本底、酶反应管和溶剂本底都分别加入2mL，pH6.0磷酸缓冲液，再用等量的pH8.8硼酸缓冲液和βH6.0磷酸缓冲液的混合溶液，定容到5mL;再离心5min，取上层清液3mL。

    (4)将各支反应溶液移入1cm比色皿中，在590nm下测定吸光度值。

    弹性蛋白酶抑制率试验案例

    检测单位：中科检测技术服务（广州）股份有限公司

    报告编号：XXXXXXXXXXXXX

    日期：2024年X月X日

    委托单位：广东XX药业公司

    样品名称：XXX抗皱精华液

    检测项目：紧致功效（弹性蛋白酶抑制率测试）

    检测依据：GDTCM-LOPt01.49（实验室方法）

    检测结果：XXX抗皱精华液的弹性蛋白酶抑制率为88.15%±0.95%，与空白组相比具有显著性差异（P<0.05），证明该精华液具有一定的紧致功效。