舒缓，在《化妆品分类规则和分类目录》中的定义是：有助于改善皮肤刺激等状态。皮肤受到刺激后若表现出高反应状态，即刺痛、灼热等主观症状或出现红斑、毛细血管扩张等客观体征，则极有可能为敏感性皮肤。《化妆品功效宣称评价规范》第九条规定：具有舒缓功效的化妆品，应当通过化妆品功效宣称评价试验方式，可以同时结合文献资料或研究数据分析结果，进行功效宣称评价。那么在实验室如何判定产品是否具有舒缓功效呢？

    中科检测是专业的化妆品检测与功效评价中心，经国家药品监督管理部门确认可承担化妆品注册和备案检验等工作，具备CMA、CNAS资质，可提供化妆品舒缓功效评价服务。

    舒缓功效评价原理

    化妆品主要从三个方面发挥舒缓功效：皮肤屏障、神经镇静、炎症反应。

    皮肤屏障功能受到损害时，易引发皮肤刺激性。在化妆品的功效研究中，通常会采用十二烷基磺酸钠(SLS)敷贴，胶带粘贴及紫外线照射三种方式对皮肤进行微弱损伤，进而进行皮肤刺激性检验。通过模拟皮肤在受到外来刺激的状态后，组织形态的变化。同时对比使用舒缓产品后皮肤状态的变化。

    根据目前已知的研究成果，皮肤产生的热痛痒都和一种神经元受体：TRPV1 有关。激活TRPV1会引起Ca2+内流，导致皮肤渗透性增加，产生刺痛、烧灼的感觉。辣椒素（CAP）能够激活TRPV1受体，引起皮肤刺激性。以TRPV1为检测指标，检测辣椒素刺激后TRPV1的表达量。

    当外界刺激皮肤时，皮肤免疫系统启动，会释放出各种各样的炎症因子以及组胺，引起血流加快、细胞的通透性增加，导致皮肤出现面部紧绷感、刺痛感、灼烧感、麻刺感、疼痛以及持续性痒感。

    炎症介质和炎症因子是目前常用于评价化妆品舒缓方式之一。脂多糖（LPS）作为一种内毒素，可引起细胞强烈的免疫反应。通过LPS刺激巨噬细胞，检测使用产品前后IL、TNF-α、PGE2等炎症介质的分泌，评价产品的舒缓能力。

    基于2D细胞的舒缓功效体外评价方法

    1、基于神经元细胞

    神经细胞在受到刺激时，膜电位会在原本的静息电位基础上转为可扩布的电位变化过程，这个过程被称为动作电位，动作电位的变化是神经反应的主要体现，峰电位是动作电位的主要组成成分，因此通常意义上的动作电位往往指峰电位。

    通过检测膜电位变化可以评价待测物对神经元动作电位的影响，从而评价待测物的舒缓功效。

    2、基于角质形成细胞

    角质形成细胞表面会表达一些能够感觉到温度、疼痛等的受体如TRP类，最典型的TRP类受体包括辣椒素受体（TRPV1），外界或内源性刺激都会激活TRPV1，从而引起Ca2+内流，导致皮肤渗透性增加，产生刺痛、烧灼的感觉。同时TRPV1还会促进释放包括P物质在内的神经源性炎症因子，进一步诱导炎症因子的分子，导致局部毛细血管扩张。

    3、基于肥大细胞

    肥大细胞在过敏反应尤其是Ⅰ型过敏反应的发生中有着非常重要的地位——抗体与肥大细胞结合后，肥大细胞脱颗粒释放组胺，从而产生刺激，导致血管通透性增强、毛细血管扩张等表观现象。

    肥大细胞受到刺激后会以胞吐形式将细胞内的颗粒释放到细胞外，在细胞膜周围可明显看到。

    通过脱颗粒细胞数的占比可以评价样品抑制肥大细胞脱颗粒的作用，样品组的脱颗粒细胞数目明显下降，即可说明样品的舒缓功效。

    4、基于巨噬细胞

    脂多糖（LPS）是革兰氏阴性细菌细胞壁外壁的组成成分，它会刺激炎症介质如TNF-α、PGE2和COX2等的分泌。我们可以利用LPS刺激巨噬细胞造模，来评估样品的舒缓功效。

    基于3D表皮模型的舒缓功效体外评价方法

    可以利用3D皮肤模型，通过UVB刺激或SLS刺激Epikutis表皮模型造模，来评估样品的舒缓功效。

    经过SLS刺激后的皮肤模型角质层分布变得疏松（图中红色箭头部分），同时活细胞层数减少（绿色箭头部分），而样品组的角质层疏松程度明显改善，对活细胞层数也有一定的改善作用，即可说明样品具有一定的舒缓功效。

    在3D表皮模型Epikutis上，还可以通过检测炎症介质和因子来评价样品的舒缓功效。