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化妆品抗皱功效测试如何做:自由基清除实验方法介绍
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  • 2024-09-20

    延缓皮肤衰老功效的化妆品不仅是基于衰老学说的理论,更多的是基于局部衰老体征的针对措施。按不同作用机制一般可将延缓衰老的活性原料分为保湿、清除自由基、吸收紫外线以及细胞修复4种类型。多数的延缓皮肤衰老的化妆品会通过其中一类或几类活性物质来达到功效作用。另外,值得一提的是,化妆品功效的发挥与两方面因素有关:一是活性成分自身具有功效;二是该活性成分需以一定浓度有效地被传送至作用位点。




    作为第三方检测中心,中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质,检测设备齐全,数据科学可靠,可出具国家认可的化妆品抗皱功效测试报告。


    抗皱功效测试原理


    根据自由基学说理论,自由基过量产生是导致皮肤自然衰老和光老化的主要原因。因此,是否具有清除自由基的能力是评价延缓衰老化妆品(原料)的重要指标之一。


    自由基过量产生是导致皮肤自然衰老和光老化的主要原因。因此清除自由基能延缓皮肤衰老,减少皱纹。1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(简称DPPH)是一种稳定的长寿命自由基,当有自由基清除剂存在时,由于与其单电子配对而使DPPH乙醇溶液光吸收减弱。DPPH乙醇溶液褪色程度与其接受的电子数呈线性关系,由此可评价试验样品清除自由基的能力,即抗氧化活性的大小。


    目前评价清除自由基能力的指标主要有:清除二苯代苦味酰基自由基(DPPH)能力、清除超氧阴离子能力、清除羟自由基能力、清除ABTS自由基能力,以及氧自由基吸附能力(ORAC)指标等。


    抗皱功效测试方法


    DPPH自由基清除法


    DPPH乙醇溶液呈紫红色,在519nm处有最大吸收波长。当加入自由基清除剂时,DPPH自由基被清除,溶液逐渐变浅,在519nm处的吸光度随之减小。溶液颜色越浅,其吸光度值越低,自由基清除剂清除DPPH自由基的效果越好。


    ABTS自由基清除法


    ABTS与过硫酸钾反应生成绿色的ABTS+。具有抗氧化性的物质可抑制ABTS+的生成,ABTS+在可见光区最大吸收峰734nm处,测定吸光度,其光度值的大小可定量得出反应物质的自由基清除能力。即其吸光度值越低,具有抗氧化性的物质清除ABTS自由基的能力越强。


    超氧阴离子自由基清除法


    邻苯三酚在碱性条件下能迅速发生氧化链式反应,释放出超氧阴离子自由基(O2—),O2—进一步加速邻苯三酚的氧化,生成在320nm处有特殊吸收的中间产物。若在反应体系中加入抗氧化物,可清除O2—,阻止中间产物的积累,使得在320nm处的吸光度减小。


    羟自由基清除法


    水杨酸与羟自由基(·OH)反应生成可2,3-二羟基苯甲酸,它在510nm处有最大吸收波长。利用过氧化氢(H2O2)与七水硫酸亚铁(FeSO4·7H2O反应生成·OH,加入具有清除自由基能力的物质,可抑制2,3-二羟基苯甲酸生成,降低510nm处的吸光度。


    抗皱功效测试案例


    1.受试物:


    测试样品原物:测试浓度为200mgmL


    阳性对照物:抗坏血酸测试浓度为0.04mg/mL


    2.测试方法:


    对试验样品进行预处理,制成溶液。加入自由基DPPH,制备多管样品,摇匀,室温下静置一段时间后,上机测试测定517nm吸光值,计算样品清除自由基的能力并计算统计学差异P值。


    3.结论:


    试验样品浓度为原液时,其自由基清除率为88.63%,且试验样品的清除率高于空白对照组的清除率且统计学差异P值<0.05,试验样品具有抗皱功效。