美白产品是化妆品一大品类，抑制黑色素的生成是美白产品最重要的一个目的。美白产品可以通过2个主要途径达到美白目的：一是通过抑制黑色素合成过程中相关酶的活性或抑制内皮素对黑色素细胞分化和酪氨酸酶活性的激活作用，以此来防止黑色素生成；二是淡化已合成的黑色素，通过促进表皮更新，加快黑色素、脂褐素等向角质层转移并随老化的角质细胞脱落而排出体外，或通过促使色素在皮肤内分解、溶解、吸收后，在体内经血液循环系统排出体外。本文主要盘点了针对化妆品的美白功效评价的方法。

    作为第三方检测中心，中科检测机构拥有CMA和CNAS认证检测资质，检测设备齐全，数据科学可靠，可出具国家认可的美白化妆品功效评价报告。

    美白功效评价：体外测试法

    （一）酪氨酸酶活性抑制实验

    人体肤色的差异主要取决于黑色素的含量及其分布，黑色素主要形成于人体皮肤表皮基底层的黑色素细胞，黑色素细胞组织中的酪氨酸在酪氨酸酶等酶的作用下，经多巴、多巴醌、多巴色素、二羟基吲哚等中间体逐步转化为真黑色素。其中酪氨酸酶是黑色素合成的主要限速酶，其活性大小决定黑色素形成的数量。对酪氨酸酶抑制作用的强弱可作为评价增白化妆品的重要参考指标。

    酪氨酸酶活性抑制试验是利用从蘑菇中提取到的酪氨酸酶，以-酪氨酸或L-多巴为底物，在体系中加入待测物、对照品和酪氨酸酶等成分进行反应，并测量其吸光值，计算得到酪氨酸酶抑制率，从而表征待测物对酪氨酸酶活性的抑制。

    （二）抗氧化、抗炎试验

    由于紫外线、体内代谢等内外因素均会促使机体产生氧自由基、炎症因子等。自由基是人体代谢过程中产生的一种垃圾毒素，人类很多疾病的产生都与自由基有关，自由基可直接或间接调控酪氨酸酶的表达，调控黑色素的合成，引起皮肤炎症、加速皮肤黑色素的产生。所以，抑制自由基的产生从一定程度上可以抑制黑色素的产生。常见的自由基有：DPPH、ABTS、超氧阴离子、羟自由基等。可通过测试样品对自由基的抑制率从而表征活性物的抗氧化、美白活性。

    （三）黑色素细胞中的黑色素含量测定实验

    黑色素细胞是机体形成黑色素、分泌黑色素的细胞，是皮肤细胞的重要组成之一。所以，通过细胞生物学法测定黑色素细胞中黑色素含量，是最有力的检测美白产品的方法。

    该实验多通过在体外培养特定的黑色素瘤细胞模型，采用分光光度法、图像分析技术等方法测试细胞内酪氨酸酶活性及黑色素含量，从而对待测物质的美白功效进行评价。为更好地模拟人皮肤中黑色素细胞的生长、黑色素的分泌，研究黑色素细胞与角质形成细胞间的相互作用和美白功效评价，现代生物技术还常常采用黑色素瘤细胞与角质形成细胞共培养模型。

    （四）黑色素的转移

    黑色素生成后需要进行转移才能到达表皮层，该过程分为两步：胞内转移和胞外转移。胞内转移是黑色素细胞受刺激产生的黑色素体，包裹在黑色素细胞中向突起末端迁移。所以，可以通过探究受试物抑制黑色素小体转移的方法，进而评价其美白功效。

    角质形成细胞黑色素摄取实验先在正常人表皮角质形成细胞培养中加入受试物，后加入带有荧光的黑色素颗粒，孵化4h后测量培养基中剩余荧光剂量，以此表示抑制物对黑色素转移的抑制效果。

    （五）非酶糖基化抑制实验

    皮肤老化的一个主要特征就是皮肤变黄和出现老年色斑，其主要原因是脂质过氧化和非酶糖基化反应。其中，生物体内非酶糖基化（Non-EnzymaticGlycation，NEG）反应是指在无酶催化的条件下，还原性糖的醛基或酮基与蛋白质等大分子中的游离氨基以交联或聚合的方式生成棕色、具有荧光性的物质——高级糖基化终产物（AdvancedGlycationEnd-products，AGEs）的过程。AGEs为棕色或者黑色的大分子物质，它出现在真皮和表皮，随着年龄的增大，人体皮肤会出现AGEs的沉积，从而导致皮肤发黄，产生褐斑、老年斑。同时，体内积累的AGEs使相邻的大分子交联，尤其是引起胶原分子间交联，致使结缔组织的通透性降低，养料及废物的扩散性能减弱，组织硬度增加，而且难以被胶原蛋白酶水解，造成皮肤弹性下降，皱纹不易平复而不断加深。

    因此，通过在体外模拟体内蛋白质非酶糖基化的过程，测试受试物抑制AGEs生成过程的能力，可评价被评估物质潜在的抗衰老、美白功效。

    （六）重组皮肤模型替代法

    三维重组皮肤模型是利用组织工程技术，将人的皮肤细胞（含黑色素细胞）培养于特定的培养皿中，构建具有三维结构的人工皮肤组织模型，通过涂抹样品后测定组织的酪氨酸酶活性、黑色素含量及相关酶的表达，从而表征样品对黑色素的抑制作用。

    美白功效评价：在体测试法

    （一）皮肤颜色测试

    客观仪器评估是通过仪器对受试者使用化妆品前后的皮肤状态参数进行采集，进而对化妆品进行功效评价的一种方法,以数据或图片的形式呈现出来，可以最大限度消除人为因素的影响。

    用于评价皮肤颜色探头式的仪器主要有CK公司的Skin-colorimeterCL400和日本柯尼卡美能达推出的色彩色差仪ChromameterCR-400。这两种探头式仪器均是应用反射分光光度法，通过检测皮肤表层结构上的紫外可见反射光，采用三维颜色空间分量的定量，来模拟并还原描述人肉眼所看到的物体颜色，经过计算综合评价皮肤的色度。

    Skin-ColorimeterCL400以颜色空间（L*a*b和RGB）中的坐标表达颜色,选择国际照明委员会(CIE)规定的Lab色度系统对受试部位的皮肤颜色变化进行测试。Lab色彩空间设计接近人类视学，是对人眼可见光诠释最好的色彩模式。L值表示亮度，值越大，颜色越偏向白色；a值表示红绿色品，+a为红色方向，-a为绿色方向；b值黄蓝色品，+b为黄色方向，-b为蓝色方向。通过前后L、a、b、ITA值的变化来判断皮肤色度的差异。

    （二）皮肤红黑色素测试

    皮肤的颜色主要由皮肤色素含量及其分布决定，人类皮肤的颜色主要取决于人体皮肤中黑色素和血红素（红色素）的含量，快速、准确地测量皮肤中黑色素和血红素的含量在化妆品的研制、医疗、美容、药品和保健品功效检测方面是非常重要的。MexameterMx18也是常用的测定皮肤色度的一种仪器，其结果输出以黑色素指数(MI)和红斑指数(EI)表示，它是基于光谱吸收的原理(RGB)，通过特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素含量，如果测量所得MI越高，说明皮肤中所含的黑色素就越高。

    （三）皮肤黑色素含量测试（Corneomelametry法）

    皮肤颜色是由皮肤中几种发色团的存在和比例引起的，主要包含皮肤中的黑色素、血红素、类胡萝卜素的含量与分布[3]。Corneomelametry法是一种客观的分析方法，可使用光密度测量法量化角质层中黑色素的含量。

    使用透明胶带（氰基丙烯酸酯皮肤表面剥离剂（CSSSs）等）等将受试者的皮肤角质层剥离，然后将剥离的样品用Fotana-Masson银染色，将样品置于配有内部光密度计的显微镜下，测定样品的光透射率，并以220放大倍率拍摄。使用0-10级的灰度判别来评估颜色的密度，从而通过计算来测定角质层细胞中的黑色素含量。

    （四）皮肤光泽度测试

    光泽度是构成物质表面视觉特征的重要参数之一。皮肤光泽度直接关系到光线进入人眼时的视觉效果，平时我们所说的容光焕发指的就是皮肤的光泽度。所以，测定皮肤的光泽度一定程度上也可以表征皮肤的美白效果。目前评价皮肤光泽度的仪器主要有CK公司的Skin-GlossymeterGL200（简称GL200）和法国OrionTechnoLab公司的皮肤光亮度测试仪GonioLux4D。

    （五）VISIA拍照

    应用VISIA拍照，通过对图像的分析也可以评价化妆品的美白功效。常用的仪器设备有美国Canfield公司的Visia和Visia-CR，对于美白功效评价可选用标准光、UV光和交叉偏振光采集面部图像，并使用图像分析软件进行量化分析，以评估皮肤颜色的变化。

    （六）主观评价法

    主观评价法包括专家评估和志愿者自我评估两种方法。专家评估多采用有经验的专家通过使用产品前、后肤色的变化就行评分，从而表征志愿者使用产品前后肤色的变化。志愿者自我评估多采用调查问卷的形式，志愿者对自我肤色的改善情况进行评估。但主观评价法多与客观仪器评价等其他方法结合，从而全面地表征化妆品的美白功效。